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质粒分享|一种关于细菌中SCF型E3泛素连接酶的泛素化级联反应

泛素化级联反应包括E1、E2和E3,负责底物识别的E3是级联反应中最丰富多样的蛋白,也是研究最多的。

(SCF)型E3泛素连接酶是多亚基蛋白组成。传统上,体外泛素化需纯化级联反应中的所有组分,操作复杂。

兰州大学甘肃省基因编辑育种重点实验室用大肠杆菌的Duet表达系统共表达E1、E2、泛素、底物及SCF复合体的四个亚基,解决传统体外实验中多亚基纯化困难、操作复杂的问题。详细内容见:https://www.mdpi.com/2218-273X/14/10/1209

文章通过Duet表达系统设计、AtSCFTIR1自泛素化验证、AtSCFTIR1可催化系统中AtIAA6泛素化和异源SCF复合物的活性验证得到了Duet表达系统无需纯化多亚基,操作简便、高效,为解析SCF型E3的功能及底物识别提供了通用工具。

文中所用质粒均在淼灵质粒平台以现货质粒进行了分享。

 

文中所涉及到的分享质粒的编号和名称如下表所示:

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