博士师姐整理质粒大提流程全解析
1.富集菌液：50 mL 的离心管收集菌液，10000 rpm/min 离心 2 min，弃上清
集菌后
2.重悬菌体：加入试剂后，用涡旋震荡仪充分悬浮菌体沉淀
重悬后
3.裂解：轻柔混匀裂解液变得清亮，如个别样品菌量过高可静置即可
加完裂解液
裂解混匀后，清澈透明
4.中和：加入中和液，轻柔混匀呈均匀絮状，混匀后离心
中和后
中和混匀后
5.过滤：将澄清上清液转移到过滤器中，进行过滤并将上清液收集
过滤上清
6.磁珠吸附：上清液中加入磁珠，置于振荡器上混匀，震荡结束后将离心管置于磁力架上，轻柔倒弃上清
7.洗涤：向离心管中加入去蛋白液后离心，弃上清
8.纯化：向离心管中加入洗杂纯化试剂后离心，弃上清
9.洗脱：将装有磁珠的50 ml离心管加入1000 μl洗脱液或者超纯水（低拷贝质粒洗脱液推荐减少洗脱体积），将磁珠充分混匀后离心，用离心管收集质粒，避免吸取到磁珠
共 1 页 1 条数据
